实时荧光定量PCR分析仪

　　近年，新研制成功的荧光定量PCR的出现为乙肝病毒的检测诊断提供了新手段，天津津门中医院大量临床标本测定结果证明，其特异性为100%，灵敏度可达0.01fg（10-12mg），相当于2.5个乙肝病毒颗粒。

 

　　荧光定量PCR对下列情况更具有独特的诊断价值：

 

　　1、治疗前进行病毒定量检测，可以指导选择对症药品，避免盲目用药。

 

　　2、治疗后定量PCR可直接准确地测定体内病毒数量，有助于疗效的判断。

 

　　3、怀孕前进行定量PCR测定，有助于选择有利的怀孕时机。乙肝孕妇进行定量PCR检查，有助于使部分患者得到及时、正确的诊断。

 

　　4、对乙型肝炎病毒 （HBV）、丙型肝炎病毒 （HCV） 定量分析显示：病毒量与某些药物的疗效关系。HCV高水平表达，干扰素治疗作用不敏感，而HCV低滴度，干扰素作用敏感；在拉米夫定治疗过程中，HBV-DNA的血清含量曾有下降，随后若再度上升或超出以前水平，则提示病毒发生变异。如PCR技术在HBV检测中的应用及意义：

 

　　a.了解乙肝病毒在体内存在的数量。

 

　　b.是否复制。

 

　　c.是否传染，传染性有多强。

 

　　d.是否有必要服药。

 

　　e.肝功能异常改变是否由病毒引起。

 

　　f.判断病人是适合用哪类抗病毒药物。

 

　　g.判断药物治疗的疗效。

 

　　实时荧光定量PCR的优势样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值（限制点的循环数）。域值应设定在使指数期的扩增效率为较大，这样可以获得较准确，可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品，线性回归分析将产生一条标准曲线，可以用来计算未知样品的浓度。

 

　　PCR检测仪具有时间省，灵敏度高，准确性好和线性范围宽等优点。７３００型实时荧光定量ＰＣＲ系由全球实时定量ＰＣＲ技术的领导者一美国应用生物系统公司于２００４年较新推出，它质量优异，实验结果准确可信，性能极其优越。

 

　　实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。

 

　　原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。