健康资讯 关于【核酸染料】，核酸染料弄到手上会怎么样，今天八宝盒小编给您分享一下，如果对您有所帮助别忘了关注本站哦。
内容导航：1、核酸染料2、核酸染料1、核酸染料核酸染料核酸染料在配置琼脂糖凝胶时融化至60℃时加入，一般是百分之一，比如称0.15克琼脂糖，加15毫升TAE，一般多一点。加入2ul的核酸染料。核酸染料的作用是和链结合，可以帮助成像，方便我们在凝胶成像设备下观看条带。
倒琼脂糖凝胶时，注意看看卡槽，方向，不要有气泡。
核酸染料（Nucleic acid dye）DNA染料：碘化丙啶（PI）、DAPI
核酸染料加热会失效吗不会失效。常用的核酸染料有：
1、EB（溴化乙锭）是高度灵敏的嵌入性芳香族荧光化合物，为强致癌诱变剂，但价格便宜，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。
2、GoldView I型/II型染料是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，也可用于RNA染色。
3、GelRed和GelGreen属于大分子产品，经过埃姆斯 AMS 和相关测试，结果表明，该染料的诱变性远小于溴化乙锭（EB），是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。
4、SYBR Green 和SYBR Gold于1995 年由 Molecular probes 公司推出，是一种高灵敏的核酸染料，稳定性差。
2、核酸染料EB（溴化乙锭）
是高度灵敏的嵌入性芳香族荧光化合物，为强致癌诱变剂，但价格便宜，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中，特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性，在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。EB的这种特性使其成为一种核酸染料，常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处有吸收峰，在紫外光的照射下，溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光（590nm）。结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出20-30倍，因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带，非常灵敏。
原理：EB是极易渗透细胞膜与胞内DNA嵌合的小分子，它具有平面共轭大环结构，这种扁平分子可以嵌入核酸双链的配对的碱基之间，是典型的DNA分子插入试剂，菲啶环插入到DNA分子的碱基对之间，与DNA嵌合形成稳定的复合物，并影响DNA的复制，破坏正常的遗传生理现象。在紫外线激发下， 未与核酸结合的溴化乙锭可被激发出橙红色荧光。在与DNA或双链 RNA结合时，荧光强度会增强20倍，使 得核酸电泳后的胶片可以辨识核酸的相对位置。在核酸分子中， EB分子插入到两层碱基对之间，发出红色荧光。在凝胶中加入终浓度为 0.5 μg/ml 的 EB，可以在电泳过程中随时观察核酸的迁移情况，这种方法适用于一般性的核酸检测。
注意：EB作为诱变性的化合物，它在人体中诱导突变的机制是不可逆转的，如果你只是手接触了用 EB污染的东西 , 用肥皂水洗一下就没事了。一定要带手套操作有 EB 污染的实验。 EB有很强的诱变剂，可引起碱基错配诱发癌变，操作时一定要慎重。
2. GoldView I型/II型染料
GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，也可用于RNA染色。
实质上，所谓的Goldview就是吖啶橙，也就是传说中的AO，[补充一下：吖啶橙（ acridine orange， AO）是最经典的极灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA 和 RNA 同时染色而显示不同颜色的荧光。 其激发峰为 492nm，荧光发射峰为 530nm（DNA ）、640nm（RNA ），它与双链 DNA 的结合方式是嵌入双链之间，而与单链 DNA 和 RNA 则由静电吸引堆积在其磷酸根上。在蓝光（502nm）激发下,细胞核发亮绿色荧光（约530nm），核仁和胞质 RNA 发橘红色荧光（ >580nm）。吖啶橙的阳离子也可以结合在蛋白质、多糖和膜上而发荧光，但细胞固定阻抑了这种结合，从而主要显DNA、RNA 两种核酸 ]。有一种传统的细胞凋亡试验，采用的染料正是吖啶橙，也就是AO/EB染色试验，EB无法穿透完整的细胞膜，而AO可以穿过细胞膜染上细胞核，以此来区分凋亡和未凋亡的细胞。
缺点：Goldview对于大片段DNA的染色效果良好，但是在对于500bp以下的片段效果不是很好，还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭，一般5-10min条带就会消失。另外Goldview不适用于胶回收。且荧光效果远不如EB，灵敏度差，本底色严重，不利用于回收，不稳定，在紫外灯下其诱导突变能力极高。
注意：GoldView是一种剧毒产品，实验是一定要带好防护手套。
本文关键词：核酸染料染色原理，核酸染料在DNA琼脂糖凝胶电泳中的作用，核酸染料和溴化乙锭的优缺点，核酸染料原理，核酸染料。这就是关于《核酸染料，核酸染料弄到手上会怎么样（核酸染料eb毒性）》的所有内容，希望对您能有所帮助！更多的知识请继续关注《八宝盒百科》百科知识网站：http://tj.jiuquan.cc！
